免疫組化實驗常見問題有哪些？

2023-10-19 免疫組織化學(immunohistochemistry，IHC)是一種綜合定性、定位和定量；形態、機能和代謝密切結合為一體的研究和檢測技術。在原位檢測出病原的同時，還能觀察到組織病變與該病原的關系，確認受染細胞類型，從而有助于了解疾病的發病機理和病理過程。那么你知道免疫組化實驗常見問題有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、石蠟切片再染色過程出現脫片現象1.烤片時間不夠，或溫度不夠，可以延長烤片時間和提高烤片溫度；2.用含有多聚賴氨酸的玻片，可以購買到或這自己做；3.有些組織本身就...

二代測序（NGS）的原理

2023-10-18 DNA測序技術一直是分子生物學相關研究中常用的技術手段之一，從一定程度上推動了該領域的快速發展。每一代測序技術的更替都標志著生物學中基因芯片、數據分析、表面化學、生物工程等技術領域有了新的突破，使測序向著高通量、低成本、高安全性和商業化的方向發展。那么二代測序(NGS)的原理是什么？讓我們一起來看看吧！第二代測序(NGS)又稱為高通量測序(High-throughputsequencing)，是基于PCR和基因芯片發展而來的DNA測序技術。二代測序引入了可逆終止末端，從而實現...

支原體污染的檢測方法有哪些？

2023-10-18 支原體污染一般在顯微鏡下不可見，很難察覺，但細胞會受到極大的損傷，主要通過以下途徑影響細胞生長及功能。那么支原體污染的檢測方法有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、分離培養法檢測方法：將待檢樣品接種到適合支原體生長的液體培養基或固體培養基中，如有支原體污染，液體培養基顏色會改變，固體培養基將會有菌落生長。優點：該方法被稱為支原體培養法的金標準，可以檢測絕大多數支原體。缺點：支原體生長到一定數量才能判斷是否有污染，檢測時間長，無法實現對支原體的快速檢測二、原位染色法檢測方法：通過染...

細胞被支原體污染，該怎么辦？

2023-10-18 支原體是目前為止發現的最小的原核生物，支原體污染一般在顯微鏡下不可見，很難察覺，但細胞會受到極大的損傷，主要通過以下途徑影響細胞生長及功能。那么細胞被支原體污染，該怎么辦呢？讓我們一起來看看吧！一、支原體污染的來源1.環境污染：如細胞培養房、細胞培養箱、超凈工作臺內已被支原體污染；2.實驗器材的污染：移液槍、移液管、細胞培養皿、水浴鍋等；3.細胞培養試劑的污染：培養基、胰酶、血清、細胞凍存液等；二、處理方法1.及時更換培養液：可以減緩支原體的污染，但不能wan全清除；2.使用...

夾心法與競爭法的ELISA檢測原理是什么？

2023-10-18 ELISA的原理是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。那么你知道夾心法與競爭法的ELISA檢測原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、夾心法原理夾心法使用的是兩個抗體夾抗原或者兩個抗原夾抗體的方法，這種復合物被稱之為三明治夾心結構，利用一對配對wan全的抗體，可以特異性檢測抗原，當然主要針對的是具有至少2個以上抗原表位的抗原，抗體的配對可是門技術活，很多公...

直接法與間接法的ELISA檢測原理是什么？

2023-10-18 在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。那么你知道直接法與間接法的ELISA檢測原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、直接法原理直接法是利用包被抗原，檢測抗體或者進行重組蛋白的活性驗證，利用蛋白與板材（即微孔板底）通過疏水鍵、流水/離子鍵的被動吸附,通過引入其它活性基團如氨基和碳基的共價結合，以及通過表面改性后的親水鍵結合等等，當然也有利用親和素預包被的板材，通過...

細胞凋亡與細胞壞死的不同點有哪些？

2023-10-17 你知道細胞凋亡與細胞壞死的不同點有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、定義細胞凋亡：細胞凋亡是一種正常的基因程序性細胞死亡，其中衰老細胞在其生命周期結束時收縮，其剩余片段被吞噬而沒有任何炎癥反應。細胞壞死：壞死是由于存在外部因素（如真菌或細菌毒素）而產生的信號導致細胞過早死亡。二、誘導細胞凋亡：當細胞發出DNA損傷或促凋亡和抗凋亡蛋白失衡的信號時，它就會被誘導。細胞壞死：它是由感染、外傷和毒素等外部存在因素引起的。三、形態變化細胞凋亡：可能會發生膜出血，但會保持膜的完整性。細胞壞...

ELISA實驗結果異常的因素有哪些？

2023-10-17 ELISA運用了免疫學原理和化學反應顯色原理，需要將抗原或抗體預包被在固相載體表面，使后來形成的抗原-抗體-酶（熒光基團）-底物復合物黏附在載體上，通過檢測OD值或發光值，來檢測靶蛋白的含量。ELISA適合用于定量檢測胞外的分泌性蛋白，檢測大分子抗原和特異性抗體等。那么ELISA實驗結果異常的因素有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、樣品樣品是檢測的前提，樣品質量會直接影響實驗結果。可以用ELISA來檢測的樣品很多，根據檢測項目不同可以是血清、血漿、唾液、尿液等，但大部分還是以血...