如何選擇ELISA試劑盒？

2023-10-17 酶聯免疫吸附試驗(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay,ELISA)技術從1970年代發展至今已近半個世紀，是一項實驗室最基本的免疫檢測技術，被廣泛的應用于基礎研究和臨床檢驗。那么面對市面上數以千計的試劑盒，數百家供應商，該如何選擇適合的ELISA試劑盒呢？讓我們一起來看看吧！一、明確研究種屬一般來說，廠家都會在產品名稱上標明種屬，且為shou個單詞，檢索種屬的常用語言為英文。如果您需對不同物種的同一因子進行定量，建議優先尋找適用于多個種屬的ELIS...

ELISA樣本處理的注意事項有什么？

2023-10-17 ELISA的檢測目的是為了實驗提供準確的實驗依據，為了保證實驗數據的可靠性，在實驗過程中必須堅持全面的質量控制和全過程質量控制，在收集標本前都必須有一個完整的計劃。那么你知道ELISA樣本處理的注意事項有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、每個樣本量收集體積=100ulx檢測種類，如果要做復孔，標本量收集體積=100ulx檢測種類x2。二、樣本收集后若在一周內進行檢測可保存于2-8°C，若不及時檢測，請進行分裝，凍存于-20°或-80°C，避免反復凍融。三、試劑盒的檢測范圍不等同...

蛋白檢測條帶的常見問題有哪些？如何解決？

2023-10-16 你知道在蛋白檢測中條帶的常見問題有哪些？該如何解決嗎？讓我們一起來看看吧！一、條帶出現位置比預期低或高①當條帶出現位置比預期低：原因：目的蛋白經過剪切或降解，有相同或相似抗原表位的蛋白被抗體檢測出解決辦法：樣品準備時候要在冰上操作；加入更過蛋白酶抑制劑；更換別的抗體②當條帶出現位置比預期略高：原因1：蛋白可能被糖基化，或氨基酸基被修飾解決辦法：使用酶去除可能的蛋白修飾；檢查抗原序列原因2：可能有融合蛋白解決辦法：查看表達序列原因3：蛋白形成二聚體或多聚體解決辦法：加強變性條件...

引物的純化方法有哪些？

2023-10-16 你知道引物的純化方法有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、脫鹽寡核苷酸合成后，為了純化寡核苷酸成為天然的DNA結構，首先必須去除保護基團。通過濃氨水處理，合成的寡核苷酸從固相載體上分離，2-氰乙氧基--磷酸二脂鍵的保護基團，以及堿基的保護基團基（苯甲酰基和異丁基）被去除，從而形成了天然的DNA結構。然而，必要的去保護步驟完成后，寡核苷酸混合物還包含幾種必須被去除的小分子有機化合物。所有非必須有機化合物被移除的過程通常叫做脫鹽。脫鹽純化可以借助反向硅膠柱進行。盡管脫鹽純化可以移除所...

培養基制備的注意事項有什么？

2023-10-13 培養基的作用是為微生物提供生長和繁殖所需的營養物質和環境條件。培養基的質量直接關系到檢驗結果的準確性和可靠性，因此對于微生物檢驗而言，培養基的質量控制尤為重要。那么培養基制備的注意事項有什么呢？讓我們一起來看看吧！一、配制要求正確按要求制備培養基是做好微生物檢驗的基礎。實驗人員使用商品化脫水合成培養基配制培養基時，要嚴格按照產品說明進行配制，并做好配制記錄。在配制過程中，實驗人員需要嚴格遵守相關操作標準，佩戴口罩進行操作，避免吸入含有有毒物質的培養基粉末，稱量、溶解應使用專門...

PCR反應污染的處理方法有哪些？

2023-10-13 PCR反應的特點是具有較大擴增能力與靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生。那么你知道PCR反應污染的處理方法有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、環境污染1.稀酸處理法：對可疑器具用1mol/L鹽酸擦拭或浸泡，使殘余DNA脫嘌呤。2.紫外照射（UV）法：紫外波長（nm）一般選擇254/300nm,照射30min即可。需要注意的是，選擇UV作為消除殘留PCR產物污染時，要考慮PCR產物的長度與產物序列中堿基的分布，UV照射僅對500bp以上長片段有效...

離心柱法提取DNA的實驗步驟與注意事項有哪些？

2023-10-12 離心柱上有硅膠濾膜，在高鹽低pH條件下，核酸能結合到硅膠膜上，而蛋白質和其他代謝產物被洗脫；后續改變反應條件到低鹽高pH來洗脫純化DNA。用離心柱法來提取DNA，得到的DNA質量好，純度和濃度較高。那么離心柱法提取DNA的實驗步驟與注意事項有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、實驗步驟1.平衡液預處理取一個新的吸附柱放在收集管中，懸空加入100μL的平衡液至離心柱中，12000rpm離心1min，倒掉收集管中的廢液，將離心柱放回收集管中，備用。2.處理材料（1）如提取材料為血液，...

如何制備蛋白質電泳凝膠？

2023-10-12 你知道該如何制備蛋白質電泳凝膠嗎？讓我們一起來看看吧！一、制備方法1.根據垂直電泳槽說明書安裝玻璃板，確定需配制分離膠的濃度和體積，配制所需分離膠；2.迅速將分離膠注入兩玻璃板間隙中，留出灌注積層膠所需空間（梳子的齒長再加1cm，用滴管小心地在分離膠上覆蓋一層0.1%SDS（當丙烯酰胺濃度≤8%時）或異丁醇或水（當丙烯酰胺濃度≥10%時），覆蓋層可防止氧擴散進入凝膠而抑制聚合反應。將凝膠垂直置于室溫下；3.分離膠聚合wan全后，倒出覆蓋層液體，用去離子水洗滌凝膠頂部數次以除去...