如何選擇ELISA試劑盒？

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA) 技術(shù)從1970年代發(fā)展至今已近半個(gè)世紀(jì)，是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室最基本的免疫檢測技術(shù)，被廣泛的應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。那么面對市面上數(shù)以千計(jì)的試劑盒，數(shù)百家供應(yīng)商，該如何選擇適合的ELISA試劑盒呢？讓我們一起來看看吧！

一、明確研究種屬

一般來說，廠家都會在產(chǎn)品名稱上標(biāo)明種屬，且為shou個(gè)單詞，檢索種屬的常用語言為英文。

如果您需對不同物種的同一因子進(jìn)行定量，建議優(yōu)先尋找適用于多個(gè)種屬的 ELISA 試劑盒，產(chǎn)品介紹中會注明「Multi-species」。

二、明確樣本類型

不同廠家驗(yàn)證樣本類型不同，即使同一廠家不同試劑盒，其驗(yàn)證樣本類型也不盡相同。特別是復(fù)雜的血漿樣本，根據(jù)樣本處理方式的差異，分為 EDTA 血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿，因此購買前需仔細(xì)核對。

三、預(yù)測目標(biāo)因子的濃度

一般來說，待測因子可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)或資料獲得參考的檢測范圍，且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。如熱門炎癥因子 IL-6，正常人血清中濃度為 3.13 pg/mL，病人會顯著增高，CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。

因而，必要時(shí)進(jìn)行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒極其重要。

若濃度太低，可選擇高敏試劑盒;若不確定待測濃度或樣本間濃度差異較大，建議使用檢測動態(tài)范圍更寬的化學(xué)發(fā)光法ELISA試劑盒。

四、檢查試劑盒進(jìn)行過哪些質(zhì)控

質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)在說明書中即可找到，在購買前檢查試劑盒是否進(jìn)行過嚴(yán)格的質(zhì)控實(shí)驗(yàn)，包括批次內(nèi)(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實(shí)驗(yàn)、線性稀釋實(shí)驗(yàn)及交叉反應(yīng)測試等，每個(gè)數(shù)據(jù)最好都看一下，確保chao強(qiáng)的結(jié)果重現(xiàn)性及準(zhǔn)確性。

五、確定需檢測的因子數(shù)量

如果待測因子超過 5 個(gè)，且樣本量較小時(shí)，單因子 ELISA 檢測方法并不是最jia選擇。

建議考慮多因子檢測方法，如固相芯片(樣本數(shù)量一般 5 個(gè)以內(nèi)，檢測指標(biāo)可達(dá)上百個(gè))及 Luminex 液相芯片方法 (檢測樣本多達(dá) 80 個(gè)，檢測指標(biāo)多達(dá) 50 個(gè))或微流控 ELISA 檢測系統(tǒng) Ella。

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