細胞計數(shù)通用步驟有什么？有何注意事項？

2023-11-29 細胞計數(shù)是指對細胞數(shù)量進行定量測定的方法。在細胞培養(yǎng)實驗中，通過細胞計數(shù)來確定細胞培養(yǎng)的密度和數(shù)量，可以掌握細胞生長的情況。同時，細胞計數(shù)也是衡量不同實驗條件下細胞生長情況的重要指標之一。那么你知道細胞計數(shù)通用步驟有什么嗎？有何注意事項呢？讓我們一起來看看吧！一、細胞計數(shù)的通用方法1.以貼壁生長的細胞為例，消化后的細胞充分重懸吹散，取一部分轉(zhuǎn)移至干凈的EP管內(nèi)，例如1mL;2.使用酒精棉球輕輕擦拭計數(shù)板表面和蓋玻片，把后者的邊緣微微濕潤，然后小心蓋在計數(shù)板的正中間，邊緣要能覆...

你知道什么是緩沖溶液嗎？

2023-11-28 你知道什么是緩沖溶液嗎？讓我們一起來看看吧！緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn)、實驗過程中的重要溶液，對穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響。最常見的幾種緩沖體系有磷酸鹽緩沖溶液、硼酸鹽緩沖溶液、三羥甲基氨基甲烷（簡稱Tris）-HCl緩沖溶液、羥yi基哌qin乙磺酸（供注射用）（簡稱HEPES）緩沖溶液。對于絕大多數(shù)生物制劑（如疫苗、抗體、ADC偶聯(lián)藥物、脂質(zhì)體等）而言，實驗操作、實際生產(chǎn)以及生物體內(nèi)的生化反應(yīng)等都需要在特定的pH值范圍內(nèi)才能正常有效地進行，從而得到準確的實驗結(jié)論或發(fā)揮最...

如何選擇緩沖溶液？

2023-11-28 三羥甲基氨基甲烷（Tris）是一種應(yīng)用非常廣泛的有機試劑。它及其衍生物被廣泛應(yīng)用于生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液的制備，可用于制作藥物、有機合成、生物緩沖劑等。其中在生化實驗中，許多蛋白質(zhì)及核酸相關(guān)的實驗都需要用Tris作為生物緩沖劑。那么你知道該如何選擇緩沖溶液嗎？讓我們一起來看看吧！TBS即Tris緩沖鹽水，是Tris-HCl緩沖鹽溶液，為等滲鹽溶液加Tris-HCl緩沖液。因為Tris堿的堿性較強，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩...

細胞消化的方法有哪些？

2023-11-27 細胞消化的方法有哪些？我們的細胞在培養(yǎng)時大部分會以貼壁的形式生長，它們在機體內(nèi)時，也是與其他細胞或者細胞外基質(zhì)結(jié)合的。細胞培養(yǎng)過程中使用的wan全培養(yǎng)基中的血清，含有許多帶陽性電荷的促細胞附著因子(層黏連蛋白Laminine、纖維連接蛋白Fibronectin等胞外基質(zhì)），能幫助細胞附著于帶陰性電荷的底物上，并形成連接、貼壁伸展。使細胞解除這種附著，就是細胞消化。那么你知道細胞消化的方法有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、機械消化法直接用培養(yǎng)基吹打或使用細胞刮刀，通過外力使細胞...

ELISA檢測時樣本實驗準備步驟有什么？

2023-11-27 在收集樣本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。那么你知道ELISA檢測時樣本實驗準備步驟都有什么嗎？讓我們一起來看看吧！1.血清室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。2.血漿應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。3.尿液用無菌管收集。離心20分鐘左...

阻斷ELISA與液相阻斷ELISA有什么區(qū)別？

2023-11-27 你知道阻斷ELISA與液相阻斷ELISA有什么區(qū)別嗎？讓我們一起來看看吧！一、本質(zhì)不同間接的酶標抗體是二抗，與待檢抗體結(jié)合；阻斷酶標抗體是一抗，與抗原結(jié)合。間接中底物降解的量與抗體量相等，阻斷底物降解量與抗體。二、實驗結(jié)果不同酶聯(lián)免疫吸附試驗：是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用zui廣的技術(shù)，其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應(yīng)板)表面，使酶標記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除，常用的ELISA法有雙抗體夾心法和間接法。OD值不同是因...

細胞侵襲實驗的常見問題有什么？如何解決？

2023-11-27 細胞侵襲是指研究細胞穿透和侵入到周圍或?qū)αⅢw組織的能力的實驗。這是一種重要的生物學過程，在胚胎發(fā)育、組織修復和疾病轉(zhuǎn)移等生理和病理過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。那么你知道細胞侵襲實驗的常見問題有什么嗎？該如何解決呢？讓我們一起來看看吧！一、細胞密度選擇不當過高或過低的細胞密度會影響細胞侵襲實驗結(jié)果。過高的細胞密度會導致細胞聚集在一起，難以穿過基質(zhì)層，而過低的細胞密度則可能導致實驗中的細胞過于分散，難以形成完整的細胞層解決辦法：應(yīng)根據(jù)實驗需求和細胞類型選擇適當?shù)募毎芏龋⒃趯嶒炃斑M行...

如何保存ELISA試劑盒？

2023-11-27 你知道該如何正確保存ELISA試劑盒嗎？讓我們一起來看看吧！ELISA檢測試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年，如果保存得當?shù)脑挘粫霈F(xiàn)問題的。但不要反復凍融。當然如果是正常的ELISA試劑盒，應(yīng)該放在4℃左右冰箱保存。但要注意的是，如果將試劑盒剛從冰箱里面拿出來就立即使用的話，可能會影響，其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現(xiàn)假陰性。建議：先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20分鐘以上后，再進行測定，以使試劑盒在ELISA檢測試劑盒使用前與室溫平衡。這樣做的目的，主要是為了在后面的...