WB實驗中條帶不跑歪的秘訣

2023-08-21 在做Westernblot實驗時，你一定會遇到各式各樣的條帶，最常見的就是條帶跑歪了，如凹型條帶、凸型條帶、斜條帶、條帶拖尾等。如何更好的做好WB實驗，讓我們一起來看看WB實驗中條帶不跑歪的秘訣吧！一、凹凸條帶的原因和解決辦法可能原因：可能是由于膠未配好（凝膠未能wan全聚合，膠中有顆粒或氣泡，凝膠未冷卻好，），也可能是電壓過高。解決方法：正確添加質量合格且未過期的AP及TEMED；過濾配膠的試劑保證配膠過程中膠內無氣泡；凝膠冷卻好后再上樣；降低電壓。二、條帶出現黑點或黑斑的...

Q-pcr 和 RT-pcr 有啥區別？

2023-08-21 Q-PCR和RT-PCR都是分子生物學中常用的技術，用于檢測和定量特定的核酸序列。Q-pcr和RT-pcr有啥區別？它們的原理和應用類型相同嗎？今天讓我們一起來了解一下吧！一、Q-pcr和RT-pcr原理上的不同Q-PCR也是基于PCR的技術，但它引入了熒光探針或熒光染料來實時監測PCR反應的進程。熒光信號的強度與目標序列的數量成正比，因此可以定量地測量起始樣品中的目標核酸數量。RT-PCR結合了逆轉錄（ReverseTranscription）和聚合酶鏈式反應（PCR）的過...

PolyPlus轉染試劑jetPRIME®產品問題匯總

2023-08-18 問題一：化合物Q：INTERFERin®是什么類型的化合物？A：INTERFERin®是新一代的非脂質體陽離子兩性分子轉染試劑，專為培養的哺乳動物細胞的siRNA轉染而開發。使用INTERFERin®，加入1nM的siRNA就能達到90%以上的沉默效率。問題二：細胞Q:INTERFERin®已成功轉染的細胞系有哪些？A:INTERFERin®已被成功用于多種貼壁細胞和非貼壁細胞系，例如HeLa，HEK-293,A549MDA-MB-23...

CRISPR Cas9酶是一種基因編輯工具

2023-08-18 CRISPRCas9酶是一種基因編輯工具，用于修改生物體的基因組。CRISPR(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)是一種存在于細菌和古細菌中的一類DNA序列，而Cas9(CRISPR-associatedprotein9)是CRISPR系統中的一種酶。從細菌中發現的一種天然的免疫系統，用于抵御病毒入侵。它通過記錄病毒的DNA片段，并將其整合到自身的基因組中，形成CRISPR序列。當同一病毒再次入侵時，CR...

原代細胞如何獲取？

2023-08-17 原代細胞(primarycell)：是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞，稱為原代細胞。一般認為，培養的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞的獲取難度大、需要考慮的問題多，原代細胞如何獲取？原代細胞的獲取，就是從活體上將組織分解成單個細胞再進行培養的過程，且整個過程要求無菌操作。具體要考慮的問題有：組織分解的方式，培養的時間，換液時間，細胞狀態判斷和凍存。一、...

懸浮細胞如何進行傳代培養？

2023-08-16 懸浮細胞傳代是一項重要的實驗操作,它可以幫助研究人員擴增和維持細胞株。懸浮細胞如何進行傳代呢？一、懸浮細胞的傳代懸浮細胞傳代比貼壁細胞傳代稍微簡單一些。由于細胞已經在生長培養基中懸浮，因此無需通過酶的作用使其從培養容器表面脫離，整個過程較為迅速，對細胞的損傷也較小。懸浮生長細胞的傳代培養要比貼壁細胞簡單得多，通常有兩種方法。1.直接給帶傳代的培養瓶中補充一定量的新鮮.培養基，然后將進行分裝。2.先通過離心棄掉營養匱乏的舊培養基，然后再用適量的新鮮培養基重懸細胞沉淀，最后將其分...

貼壁細胞如何進行傳代培養？

2023-08-15 隨著CAR-T治療的火熱，細胞和基因治療也進入了白re化的狀態，細胞培養就稱為通向CAR-T治療的第一步。貼壁細胞如何進行傳代培養？讓我們一起來看看吧！一、所需材料★裝有貼壁細胞的培養容器★經過組織培養處理的培養瓶、培養板或培養★wan全生長培養基，預熱至37℃★一次性無菌15ml試管★37℃培養箱，充有二氧化碳濃度為5%的濕化空氣★平衡鹽溶液，例如:杜爾貝科磷酸鹽緩沖液(DPBS)，不含鈣、鎂和酚紅消化酶，例如：胰蛋百酶，不含酚紅二、貼壁細胞傳代流程細胞培養一定要保持工作區...

細胞系和細胞株是一回事嗎？

2023-08-15 細胞系和細胞株是細胞生物學中常用的兩個概念，它們在研究細胞的生理、生化、遺傳和分子生物學等方面起到了重要的作用。細胞系和細胞株是一回事嗎？讓我們來看看吧！一、定義細胞系是指從原始組織或細胞中通過培養和傳代培養等方法獲得的由同一種細胞組成的細胞群體。簡單來說細胞系是通過將原始細胞進行一系列培養和傳代培養過程，使其能夠持續增殖并具有某些特定的性質或表達某些特定的基因。細胞株是指從細胞系中分離出的一部分細胞，這些細胞具有類似的性狀、表型和功能。細胞株是從細胞系中選擇并進行亞分化培養...