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影響ELISA結果的因素有哪些?
2023-10-08
ELISA酶聯免疫吸附試驗是目前臨床上zui常用的免疫學檢驗方法,由于其試劑穩定,易保存,操作簡便,結果判斷較客觀,既適宜于大規模篩查試驗,又可用于少量標本的檢測,既可以做定性試驗也可以做定量分析,目前已廣泛用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子檢測等領域。那么你知道影響ELISA結果的因素有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、樣品樣品是檢測的前提,樣品質量會直接影響實驗結果。可以用ELISA來檢測的樣品很多,根據檢測項目不同可以是血清、血漿、唾液、尿液等,但大部分還是以血清為...
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RNA提取的注意事項有哪些?
2023-10-07
RNA是目前發現細胞內生物功能zui豐富多樣的生物大分子,同時是DNA與蛋白質信息傳遞的橋梁,因此完整RNA的提取和純化是功能基因組時代的重要手段。那么你知道RNA提取的注意事項都有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、如何保存提取出的RNA?提取后溶解于RNase-freeWater中,RNA樣品建議立即進行下游實驗,如需儲存,建議分裝保存于-80℃。避免多次取用樣品,反復凍融。二、為什么提取的RNA有降解?1.使用的組織材料不新鮮。提取RNA應采用新鮮的組織材料,或將新鮮組織材...
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你知道PCR檢測技術的分類嗎?
2023-10-07
分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料,用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常,從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。其基本原理是檢測DNA或RNA的結構是否變化、量的多少及表達功能是否異常,以確定受檢者有無基因水平的異常變化,對疾病的預防、預測、診斷、治療具有重要意義。那么你知道PCR檢測技術的分類嗎?讓我們一起來看看吧!PCR技術是一種用于擴增特定DNA片段的分子生物學技術,基本原理是在反應室中模擬細胞內的DNA復制,即人為創造核酸半保留復制條件,使目的DN...
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內切酶實驗的注意事項有哪些?
2023-10-07
你知道內切酶實驗的注意事項有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、限制性內切酶一般反應條件當進行限制性酶切反應時,為確保最佳的反應條件,務必要遵守限制性內切酶供應商提供的建議。在此過程中需要考慮的重要參數包括:底物(DNA)和酶的量、反應體積以及孵育時間。根據傳統的定義,在最佳反應條件下,一個單位的限制性內切酶可以在1小時內,在50μL體系中wan全酶切1μL定義底物(例如,質粒pUC19)。盡管單位定義提供了一種測定方式,但還需注意,根據DNA底物之中的識別序列出現的頻率及所用底...
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熒光原位雜交實驗的原理是什么?
2023-10-07
熒光原位雜交(FluorescenceinsituhybridizationFISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變異分析、病毒感染分析、人類產前診斷、腫瘤遺傳學和基因組進化研究待許多領域。那么你知道熒光原位雜交實驗的原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!熒光原位雜交(Fluorescenceinsituhybridizat...
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你知道熒光原位雜交實驗的方法與步驟是什么嗎?
2023-10-07
熒光原位雜交是一門新興的分子細胞遺傳學技術,目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變異分析、病毒感染分析、人類產前診斷、腫瘤遺傳學和基因組進化研究待許多領域。那么你知道熒光原位雜交實驗的方法與步驟是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、探針變性將探針在75℃恒溫水浴中溫育5min,立即置0℃,5~10min,使雙鏈DNA探針變性。二、標本變性(1)將制備好的染色體玻片標本于50℃培養箱中烤片2~3h。(經Giemsa染色的標本需預先在固定液中退色后再烤片)。...
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細胞轉染過程中需要注意什么?
2023-09-28
隨著基因和蛋白功能的深入研究,轉染已經成為科研實驗中最chang用的技術手段之一。那么在細胞轉染過程中需要注意什么呢?讓我們一起來看看吧!一、轉染試劑不同細胞系轉染效率通常不同,但細胞系的選擇通常是根據實驗的需要,因此在轉染實驗前應根據實驗要求和細胞特性選擇適合的轉染試劑。每種轉染試劑都會提供一些已經成功轉染的細胞株列表和文獻,通過這些資料可選擇最shi合實驗設計的轉染試劑。不同轉染試劑有不同的轉染方法,但大多大同小異。轉染時應跟據具體轉染試劑推薦的方法,但也要注意,因不同實...
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細胞轉染是如何分類的?
2023-09-28
細胞轉染是指將外源性基因導入到細胞內的技術。那你知道細胞轉染是如何分類的嗎?讓我們一起來看看吧!一、根據導入時間長短進行分類根據導入的核酸存在于宿主細胞的時間長短,可以分為瞬時轉染和穩定轉染。瞬時轉染(transienttransfection):指將構建好的質粒通過某種方式導入到哺乳動物細胞內,該質粒上的外源基因不整合到細胞自身的基因組上。細胞中瞬時轉染的外源基因表達時間有限,通常僅持續幾天,直到外源基因在細胞分裂過程中因各種因素丟失為止。多用于啟動子和其他調控元件的分析。...