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產(chǎn)品簡介
CHO細胞專用轉染試劑盒——PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit，用于CHO細胞的高密度無血清懸浮培養(yǎng)、DNA 瞬時轉染及蛋白表達。
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一、產(chǎn)品簡介
CHO細胞專用轉染試劑盒——PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit，是一款高效經(jīng)濟的核酸轉染試劑，專門用于在CHO懸浮細胞進行重 組蛋白生產(chǎn)的試劑盒，包含轉染試劑、稀釋液、無血清培養(yǎng)基、補料、增強劑等組分，具有操作簡單、價格便宜、 蛋白產(chǎn)量高等優(yōu)點。
PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit適用范圍：CHO細胞的高密度無血清懸浮培養(yǎng)、DNA 瞬時轉染及蛋白表達。
二、實驗操作流程
1.細胞接種（以25mL體系為例）：
根據(jù)細胞狀態(tài)，選擇合適的接種密度，建議接種密度為2.5~3×106 cells/mL，待第二天細胞密度達到6×106 cells/mL左右，活性大于95%時進行轉染。
2.瞬時轉染：
建議質粒（μg）與試劑（μL）參考配比區(qū)間為1:2~1:4之間。具體步驟如圖1所示（以1:3為例）：
（1）使用本樣品前渦旋混勻5秒，使用1.25 mL PolyTool™ CHO Medium稀釋75 μL的轉染試劑，并吹打均勻；
（2）使用1.25 mL PolyTool™ CHO Medium稀釋25 μg質粒，并吹打混勻；
（3）將(1)和(2)所述溶液混合均勻；
（4）將(3)所述混合溶液室溫靜置孵育10~15 min；
（5）將(4)中的復合物溶液加入25 mL的細胞培養(yǎng)體系中，放回搖床中，在37 ℃、震蕩速度120 rpm下繼續(xù)培養(yǎng)。
3.產(chǎn)物表達與檢測：
（1）轉染24小時、72小時、120小時、168小時后加入3%（0.75 mL/25 mL）PolyTool™ CHO S1補料、0.3%（75 μL/25 mL）PolyTool™ CHO S2補料。
若想獲得高表達效果，24 小時添加完補料后，將細胞轉移至32℃搖床培養(yǎng)箱中進行低溫表達（葡萄糖控制在 4~8 g/L）。
（2）轉染后第 6~8 天測定產(chǎn)物表達量。大多數(shù)蛋白的合成在轉染后第7天左右可達到最高值，客戶可根據(jù)細胞狀態(tài)及表達量選擇適宜的收獲時間。
圖1 細胞轉染示意圖
CHO細胞專用轉染試劑盒PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit代理——天津益元利康生物科技有限公司，成立于2018年，坐落于天津經(jīng)濟技術開發(fā)區(qū)。公司產(chǎn)品線涉及細胞與基因治療、免疫學、分子生物學、細胞生物學等多個方向，專注于生命科學試劑、耗材、細胞、儀器等產(chǎn)品銷售，經(jīng)營的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam等等。我們提供質優(yōu)價美的產(chǎn)品、及時到位的服務，努力成長為生命科學和生物技術企業(yè)的優(yōu)質供應商。
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