PAS糖原染色的常見問題有哪些？如何解決？

2023-11-06 PAS糖原染色的常見問題有哪些？如何解決？PAS糖原染色實驗是通過特殊的化學反應使細胞和組織中的糖原與染料結合，形成紫紅色或洋紅色的顏色，從而可視化糖原的分布和定量。PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質。那么你知道PAS糖原染色的常見問題有哪些嗎？該如何解決呢？讓我們一起來看看吧！一、染色結果不明顯或弱①糖原濃度低：如果樣品中的糖原含量較低，則染色結果可能會很弱。可以嘗試增加染色時間或使用更敏感的檢測方法。②酶消化不充分：細胞或組織中存在其他...

如何選擇合適的感受態細胞

2023-11-06 細菌轉化是受體細菌以低頻率從環境中吸收外源DNA的天然過程，經轉化后的細菌可表達相應的遺傳形狀，是遺傳多樣性的來源之一，也可能為宿主細菌帶來額外的好處（如抗生素抗性）。感受態細胞是通過物理或化學方法進行誘導，使其處于最適攝取或容納外源DNA的生理狀態，可高效吸收環境中的DNA分子。那么你知道該如何選擇合適的感受態細胞嗎？讓我們一起來看看吧！感受態細胞常用于分子克隆中，用于復制增殖重組DNA分子。但感受態細胞多種多樣，當選擇感受態細胞進行轉化時，需要考慮多種因素，如轉化方式、轉...

原代細胞培養的常見問題

2023-11-02 原代細胞培養也叫初代培養，是建立細胞系的第一步，其步驟包括取材→分離→培養和維持。那么你知道原代細胞培養的常見問題有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、倍增和代數有什么區別倍增是培養物中細胞總數的翻倍，通常是指細胞指數或對數生長期。代數是指細胞群從培養瓶中移出，傳代培養過程的次數，傳代培養的目的，是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。二、接收到的凍存細胞該如何處理收到包裝箱后，立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快，以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃，這樣會對細胞造成...

免疫共沉淀實驗操作有哪些？

2023-11-02 免疫共沉淀（CO-IP）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。那么你知道免疫共沉淀實驗操作有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、蛋白樣品制備裂解提取出免疫沉淀需要的蛋白樣品，以下為HEK293T細胞樣品的處理方法，其余的樣品制備方法參閱相關文獻。單層貼壁細胞總蛋白的提取：1.收集細胞：10cm細胞培養板上，每板細胞加1ml，4℃預冷的PBS（0.01MpH7.2～7.3）。反復沖洗把所有掛壁細胞洗下來轉移到1.5ml離心管內離心：3400rpm2...

研究蛋白質相互作用的方法有哪些？

2023-11-02 相當多的蛋白質行使功能的時候并不是單打獨斗的，蛋白質們通過蛋白質相互作用形成復合體然后進行工作。因此，研究蛋白質的相互作用成為研究蛋白質功能和作用機制的最為重要的環節之一。那么你知道研究蛋白質相互作用的方法有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、酵母雙雜交系統原理：很多真核生物的位點特異轉錄激活因子通常具有兩個可分割開的結構域，即DNA特異結合域（DNA-bindingdomain,BD）與轉錄激活域（Transcriptionalactivationdomain,AD）。這兩個結...

ELISA實驗的操作要點有什么？

2023-11-01 優質的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，那么你知道ELISA實驗的操作要點有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液)，有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白...

RNA提取準備工作及注意事項有什么？

2023-11-01 你知道RNA提取準備工作及注意事項都有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、槍頭和EP管等的消毒滅菌1.用去離子水配制0.1%（千分之一）的DEPC（劇毒物），須在通風櫥中小心使用，避光密閉4℃保存;DEPC水是用DEPC處理過并經高溫高壓消毒的純水。經檢測不含RNase、DNase和proteinase。2.將槍頭和EP管放入0.1%的DEPC內，保證槍頭和EP管內都充滿0.1%的DEP。3.避光、靜置、過夜（12-24h）4.裝槍頭和EP管的盒子不需要用DEPC浸泡，將槍頭或者...

如何配置培養基？

2023-10-31 你知道該如何配置培養基嗎？讓我們一起來看看吧！一、細胞實驗全程注意事項1.無菌操作是重中之重，細胞培養對無菌條件比較苛刻，實驗人在進行整個細胞實驗的無菌意識一定要強，否則一個不小心，發生細菌污染，輕則浪費細胞，重則污染整個培養箱。2.實驗人員進入細胞房前應該換上干凈的鞋子、白大褂、手套和口罩。3.所有耗材放入工作臺前都需用75%酒精進行消毒，雙手進入工作臺前也需要用75%的酒精進行消毒。4.進行實驗前應先對工作臺進行紫外滅菌30min以上，并將所有需要用到的耗材放到工作臺上一...