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    • 細(xì)胞的凍存

      2023-02-22 細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,利用凍存技術(shù)將細(xì)胞冷凍保存在-196℃液氮中,可以使細(xì)胞暫時(shí)停止生長(zhǎng)并保留細(xì)胞特性,以便在需要時(shí)再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。同時(shí)保存適量的細(xì)胞,可以防止細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中因受到污染或其他意外事件導(dǎo)致細(xì)胞丟種,起到細(xì)胞保種的作用。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇采取“慢凍快融”的原則,慢速冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水份滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)形成冰晶的機(jī)會(huì);快融以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化,避免慢速融化水份滲入細(xì)胞內(nèi),再次形成胞內(nèi)冰晶造成對(duì)細(xì)胞的損傷。細(xì)胞凍存時(shí)需向培養(yǎng)基中加入冷凍保護(hù)劑...
    • mRNA疫苗工作原理

      2023-02-20 新冠mRNA疫苗的工作原理是將病毒的部分mRNA片段(S蛋白序列或S蛋白上受體結(jié)合區(qū)RBD序列)以特殊的脂質(zhì)膜包裹,注入人體細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生抗原,再由此激發(fā)特異性免疫反應(yīng),達(dá)到形成免疫記憶的效果。相較于其他疫苗,其優(yōu)勢(shì)主要體現(xiàn)在:1.mRNA不進(jìn)入細(xì)胞核,不會(huì)整合到人體基因組,消除了插入突變,極大程度上避免了引發(fā)患腫瘤癌癥等疾病的風(fēng)險(xiǎn);2.具有體液免疫及T細(xì)胞免疫雙重機(jī)制,免疫原性強(qiáng);3.研發(fā)周期短,尤其是在應(yīng)對(duì)病毒變異時(shí),只需對(duì)S蛋白序列的堿基進(jìn)行突變,就能夠快速開發(fā)新型候選疫苗...
    • PCR/qPCR耗材選擇——密封產(chǎn)品篇

      2023-02-17 最常見的是聯(lián)排管蓋和粘性封板膜。聯(lián)管蓋主要用于密封PCR/qPCR聯(lián)管和板,粘性封板膜主要用于密封PCR/qPCR板。qPCR的管蓋與封板膜應(yīng)該相同厚度和透明度的光學(xué)特性。1.管蓋聯(lián)蓋是最常見的密封形式。除了適配性外,還需要考慮管蓋的透光度和形狀。雖然管蓋的透明度對(duì)DNA擴(kuò)增沒(méi)有影響,但超透明或光學(xué)蓋對(duì)于在qPCR實(shí)驗(yàn)中收集可靠數(shù)據(jù)非常重要。管蓋的頂部分為平頂(flat)或圓頂(domed)。如何選擇取決于所使用的PCR儀熱蓋設(shè)計(jì)。如果蓋子具有稍微凹入的內(nèi)表面以防止管子變形,...
    • 給藥泵的使用優(yōu)勢(shì)

      2023-02-16 給藥泵的原理:當(dāng)泵體被植入動(dòng)物體內(nèi)時(shí),由于滲透壓差迫使體液透過(guò)泵表面的半透膜流向高滲鹽夾層,擠壓貯藥囊,使藥物按照預(yù)定速度經(jīng)導(dǎo)流管釋放到大鼠(包括幼體)、小鼠和其他實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物體內(nèi)。該泵由外到內(nèi)分為三層,最外層是半透膜材料,最內(nèi)層為不透水彈性材料制成的貯藥囊,中間為高滲的鹽夾層組成。給藥泵的優(yōu)勢(shì):該泵對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物連續(xù)、準(zhǔn)確、受控的給藥。可以實(shí)現(xiàn)無(wú)人值守、準(zhǔn)確給藥的效果,從而減輕實(shí)驗(yàn)室工作人員的夜班和周末給藥的麻煩,節(jié)約了時(shí)間,同時(shí)無(wú)需外部連接和頻繁處理動(dòng)物,極大的提高了治療的效...
    • PCR/qPCR耗材選擇——板類特征篇

      2023-02-15 ①規(guī)格:PCR/qPCR板一般有24孔、48孔、96孔、384孔。②裙邊:裙邊是孔板周圍的板。它的作用是可以在移液過(guò)程中提供較好的穩(wěn)定性,也方便自動(dòng)化機(jī)器人的處理。PCR/qPCR平板可分為無(wú)裙邊,半裙邊和全裙邊。無(wú)裙邊板缺少周圍的板,它可與絕大多數(shù)PCR儀和qPCR儀的模塊適配,但不適用于自動(dòng)化應(yīng)用。半裙邊板是在孔板的邊緣有短裙邊,可以在移液過(guò)程中提供較好的穩(wěn)定性,也方便自動(dòng)化機(jī)器人的處理。全裙邊的PCR/qPCR板是有著超過(guò)板高度的邊緣板。它適用于具有突出模塊的PCR儀,...
    • PCR/qPCR耗材選擇——一般特征篇

      2023-02-13 (1)規(guī)格常見的PCR/qPCR耗材規(guī)格如下管:0.5mL,0.2mL,0.1mL96孔板:0.2mL,0.1mL384孔板:0.02mLPCR/qPCR管/板的規(guī)格決定了反應(yīng)體積。如果加入過(guò)多的樣品,一方面會(huì)導(dǎo)致熱傳導(dǎo)的效率下降,另一方面會(huì)導(dǎo)致樣品溢出或者污染;如果加入的樣品過(guò)少,又會(huì)因?yàn)轭l繁的熱循環(huán)導(dǎo)致水分蒸發(fā),進(jìn)而導(dǎo)致體系不足、樣品損耗,實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)誤差或者無(wú)結(jié)果。并且選用的耗材需根據(jù)PCR儀的加熱模塊來(lái)決定,以求最DA程度的熱傳導(dǎo)的匹配。(2)高度PCR/qPCR管/板有...
    • PCR/qPCR耗材選擇——材料及顏色篇

      2023-02-09 目前市場(chǎng)上大多數(shù)PCR/qPCR管材選用的是聚丙烯材料。聚丙烯是一種惰性的有機(jī)材料,對(duì)反應(yīng)物質(zhì)的吸收值最小,并且聚丙烯可以承受PCR過(guò)程中的溫度變化,在經(jīng)過(guò)溫度變化后不易變形,因此可以確保獲得最佳的PCR結(jié)果。在生產(chǎn)過(guò)程中,為了保證生物兼容性、純度以及批次間的一致性,應(yīng)當(dāng)使用全新的醫(yī)學(xué)級(jí)的分子生物學(xué)級(jí)別的高品質(zhì)的聚丙烯作為原料進(jìn)行生產(chǎn)。有些PCR/qPCR板為了配合高通量機(jī)器人的操作,需要具有更高強(qiáng)度的邊框來(lái)配合機(jī)器人的抓取,通常情況下邊框的材料使用的是更高強(qiáng)度的聚碳酸酯。在...
    • 提取FFPE組織中的核酸時(shí)的難點(diǎn)

      2023-02-07 使用福爾馬林固定過(guò)組織,其組織中的蛋白質(zhì)與核酸(DNA與RNA)會(huì)失去生物活性。福爾馬林和石蠟作為固定劑和包埋劑,將細(xì)胞保護(hù)在其中,十分影響核酸的提取,并且長(zhǎng)時(shí)間的保存可能會(huì)使樣品中的核酸發(fā)生降解。傳統(tǒng)的方法會(huì)使用二甲苯來(lái)溶解石蠟,這種有機(jī)溶劑高度易燃,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要先多次使用二甲苯來(lái)溶解石蠟,之后需要多次使用乙醇來(lái)沖洗殘留的二甲苯。在使用二甲苯溶解石蠟的過(guò)程中,大量的二甲苯可能會(huì)對(duì)核酸造成損傷,進(jìn)一步加劇核酸的降解;在溶解與沖洗過(guò)程中,即使再仔細(xì)也難免將寶貴的組織材料沖掉...
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