血清的保存與分裝

　　關(guān)于血清的保存條件，這是一個非常重要且常見的問題。正確的保存是保證血清質(zhì)量和細胞培養(yǎng)實驗成功的關(guān)鍵。
 

　　以下是血清保存條件的詳細說明，主要針對最常見的胎牛血清，其他類型血清(如小牛血清、馬血清等)也適用類似原則。
 

　　一、血清保存的核心原則：避免反復(fù)凍融
 

　　反復(fù)凍融是損害血清質(zhì)量的最主要因素。它會導(dǎo)致：
 

　　蛋白質(zhì)變性、沉淀。
 

　　營養(yǎng)成分降解。
 

　　生長因子活性喪失。
 

　　增加沉淀物的形成。
 

　　二、血清的建議存儲溫度與解凍
 

　　1.儲存：建議將血清儲存在-15℃~-20℃。
 

　　Ps:已開封血清的保存
 

　　最佳實踐：分裝！分裝！分裝！
 

　　這是保護血清活性最有效的方法。收到血清后，在首次解凍后立即進行無菌分裝。
 

　　分裝體積：根據(jù)您每次實驗的常用量(如 50mL/管)，確保每管能在短時間內(nèi)用完。
 

　　儲存：將分裝好的血清立即放回-20°C或-80°C冷凍。使用時取出一管，其余血清仍處于未解凍狀態(tài)。
 

　　2. 解凍：不建議于4℃過夜解凍，也不建議直接將冷凍的血清放在37℃水浴或者溫箱中解凍，因為若血清沒有混勻，底部的蛋白會變性形成沉淀。
 

　　血清解凍的方法(三步法)
 

　　三、 可能出現(xiàn)的問題：血清沉淀物
 

　　血清在儲存和解凍過程中出現(xiàn)沉淀是常見現(xiàn)象，主要有：
 

　　脂蛋白聚合物：顯微鏡下可見的小黑點，通常不影響細胞生長。
 

　　磷酸鈣結(jié)晶：外觀像白色碎片或絮狀物，可能影響細胞生長。
 

　　纖維蛋白：肉眼可見的絮狀沉淀。
 

　　如果沉淀量不多，無需特別處理。如果量多，建議過濾后使用。
 

　　四、總結(jié)：最佳操作流程
 

　　收貨檢查：收到血清后，檢查包裝是否完好，立即根據(jù)計劃儲存于-20°C。
 

　　首次處理：使用時，從冰箱取出，置于4°C 過夜解凍。
 

　　立即分裝：解凍后，在超凈工作臺中進行無菌分裝至多個小體積無菌離心管中。

 

　　冷凍儲存：將分裝管立即放回-20°C冷凍。
 

　　日常使用：每次實驗取出一管分裝血清，在4°C解凍或室溫水浴快速解凍后使用。已解凍的血清如在1個月內(nèi)不能用完，建議丟棄或重新過濾后4°C短期保存。
 

　　遵循以上保存條件，可以最大限度地維持血清的生物學(xué)活性，確保您的細胞培養(yǎng)實驗結(jié)果穩(wěn)定可靠。