polysciences24765說明書

規格:

100mg，1 g,  1 ml

貯存條件:

避光，-20度

CAS號:

PEI MAX - Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride (MW 40,000)   CAS Number: 49553-93-7
MaxFect Transfection Regent       CAS Number: 49553-93-7       
 

物理性狀:

固體為白色或近白色粉末。 1 mg/mL水溶液透明，接近無色或略顯黃色。

用途:

細胞培養級別的質粒轉染。本產品僅供科研使用，不能用于臨床治療。

PEI MW25000和PEI Max MW40000區別：

PEI MAX MW40000 ( Polysciences#24765-1)是線性化聚乙烯亞胺PEI MW25000(Polysciences#23966-1)的升級產品，是一種功能更為強大的高效瞬時轉染試劑。PEI MAX MW40000與PEI 25000的區別在于：
1）wanquan水解（去乙酰化）
2）PEI 25000的鹽酸鹽形式，具更高的水溶特性
3）含更長連續性乙烯亞胺片段，其轉染效率比PEI MW25000提高11%以上。

4）PEI MAX 40K比PEI 25K更易于使用，并且更高效。PEI 25K轉染溶液通常需要幾個小時才能制備，而PEI MAX 40K可以在兩個小時內轉化為即用型可溶性溶液。
5）PEI 25K含有4-11%的殘余丙酰基，可防止聚合物主鏈與DNA強烈結合。PEI MAX 40K去乙酰化的結構意味著每批產品的表現始終如一，穩定性更強。

儲存濃度:

1 mg/ml

工作濃度:

3 ug/ml 左右，每ml培養基加入3 ul儲存液。

PEI轉染試劑配置方法：

1. 稱取100mg PEI轉染試劑，溶解于100ml無菌水中。配置的終濃度是1 mg/ml.
2. 緩慢使用稀鹽酸，調節PH至7.0，一定不要讓pH過了，一旦過了效果就不好了。
3. 使用0.1um或者0.22um無菌過濾器，過濾除菌。
4. 分裝成每管500ul-1ml，-20度，保存，備用。
5. 使用超純水配置，器具一定要滅菌干凈，防止支原體污染。
 

適用范圍:

本產品適用于絕大多數真核細胞質粒轉染：HEK 293，293T，A549，B16F10，HeLa，Hepa 1-6，Hepa-1c1c7，HepG2，BHK-21，C2C12，C6，CHO-K1，COS-1，COS-7，Daoy，DU 145，K562，KB，LL/2(LLC1)， LNCaP-FGC，MCF-7，MEL，Neuro-2a，NIH3T3，OVCAR-3，PC-3，PC-12等。

細胞培養基:

PEI轉染試劑適用于大多數常用細胞培養基，且轉染前后不需要更換培養基，血清的存在不影響轉染效率。
 

轉染時細胞密度：

一般來說，當細胞密度達到60% - 80%時進行轉染可以取得較高的轉染效率。然而，不同細胞的最適轉染密度都不盡相同。因此在初次轉染某種細胞時，可以通過預實驗先確認該細胞最佳的轉染密度。

轉染質粒純度和濃度：

用于細胞轉染的DNA應具有較高的純度，且無內毒素殘留(推薦使用無內毒素質粒大提試劑盒進行質粒抽提)。質粒濃度盡量高一些，建議大于500 ng/ul.

轉染比例：

DNA：PEI = 1:3
1ml細胞培養液，建議使用1 ug-3 ug DNA 和3 ul - 9 ul PEI轉染試劑儲存液。具體根據細胞情況自由調整。

在初次轉染某種細胞時，推薦PEI和DNA的比例為2:1，即1 μg DNA使用2 μl PEI。轉染1 μg DNA所使用的PEI轉染試劑劑量可以在1 - 5 μl之間進行調整以獲得最佳的轉染效率。
 

轉染后細胞培養時間:

對于絕大多數細胞實驗而言培養24 - 48 h即可，如實驗情況特殊可在12 - 72 h之間進行優化。