化學(xué)轉(zhuǎn)染分類及介紹

標(biāo)題：化學(xué)轉(zhuǎn)染分類及介紹

一、轉(zhuǎn)染

轉(zhuǎn)染(transfection)是細(xì)胞在一定條件下主動(dòng)或被動(dòng)導(dǎo)入外源DNA片段而獲得新的表型的過(guò)程。

二、化學(xué)轉(zhuǎn)染

1.陽(yáng)離子脂質(zhì)體

【原理】帶正電荷的脂質(zhì)體（由磷脂、膽固醇等組成的具有脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)）依靠靜電作用與DNA形成DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物，通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞.

【優(yōu)點(diǎn)】操作簡(jiǎn)便

適合轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞

對(duì)DNA濃度有一定要求

重復(fù)性好，但轉(zhuǎn)染時(shí)需除血清

【缺點(diǎn)】需進(jìn)行條件優(yōu)化（一些細(xì)胞對(duì)陽(yáng)離子脂質(zhì)體較敏感）

有些細(xì)胞系不容易轉(zhuǎn)染

血清的存在干擾復(fù)合物的形成，導(dǎo)致低轉(zhuǎn)染效率

2.陽(yáng)離子聚合物（如聚乙烯亞胺（PEI））

【原理】帶正電的聚合物與DNA形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用，并通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞

【優(yōu)點(diǎn)】不含疏水部分而wan-quan溶于水

可進(jìn)行化學(xué)修飾

不像脂質(zhì)體一樣破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)

濃縮DNA，將DNA運(yùn)送到細(xì)胞內(nèi)，并其在細(xì)胞核內(nèi)釋放

細(xì)胞毒性很低，高效

不被血清清除

【缺點(diǎn)】不能生物降解（樹(shù)枝狀大分子）

只限于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

3.磷酸鈣法

【原理】磷酸鈣能夠促進(jìn)外源DNA和細(xì)胞的結(jié)合，磷酸鈣-DNA復(fù)合物能夠附著到細(xì)胞表面，并通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞

【優(yōu)點(diǎn)】操作簡(jiǎn)單

對(duì)DNA濃度要求高

【缺點(diǎn)】對(duì)pH值敏感，需仔細(xì)制備試劑

適用性有局限（不適用于原代細(xì)胞和懸浮細(xì)胞）

不能采用RPMI培養(yǎng)基（含有高濃度的磷酸鹽）

三、Polyplus轉(zhuǎn)染試劑

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