淺析流式細(xì)胞分選抗體選擇的基本條件

　　流式細(xì)胞分選抗體選擇的基本條件：目標(biāo)蛋白特異性，反應(yīng)種屬以及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)。流式抗體熒光標(biāo)記的方式包括直接標(biāo)記和間接標(biāo)記兩種。在流式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，盡量減少實(shí)驗(yàn)工序和過(guò)程，以保證實(shí)驗(yàn)的真實(shí)和準(zhǔn)確性。因此在條件允許的范圍內(nèi)，建議盡量用直接標(biāo)記的抗體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)而不去做間接標(biāo)記。
 

　　如果同時(shí)檢測(cè)多個(gè)指標(biāo)：確認(rèn)流式細(xì)胞儀能檢測(cè)多少個(gè)通道，流式抗體每個(gè)通道只能選擇1種熒光素。各個(gè)通道之間的熒光素可以隨意搭配。如實(shí)驗(yàn)者同時(shí)檢測(cè)三個(gè)指標(biāo)，可以適當(dāng)?shù)倪x擇一個(gè)熒光素標(biāo)記，F(xiàn)ITC、PE和PE-cy5。切忌所有指標(biāo)選擇同一個(gè)通道的熒光標(biāo)記，以防止熒光的重疊和相互干擾，影響結(jié)果。因此，流式細(xì)胞儀的通道越多，同一份樣本能同時(shí)做的表面/胞內(nèi)標(biāo)志就越多。
 

　　流式細(xì)胞分選抗體使用注意事項(xiàng)：
 

　　1.流式使用申請(qǐng)者可提前5天電話(huà)預(yù)約或者到中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院科技樓北806預(yù)約，至少提前一天預(yù)約。
 

　　2.預(yù)約時(shí)說(shuō)明：制備的樣品細(xì)胞的種類(lèi)、細(xì)胞的大小、熒光標(biāo)記的情況(幾種熒光染色，熒光染料的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)，需要的目的細(xì)胞)
 

　　3.樣品請(qǐng)按時(shí)制備好，如果超過(guò)預(yù)約時(shí)間20min還沒(méi)制備好，則取消本次預(yù)約時(shí)間段的使用，或者由下一個(gè)客戶(hù)頂上。
 

　　4.每天預(yù)約的客戶(hù)要提供無(wú)菌的生理鹽水，生理鹽水的提供量我們會(huì)根據(jù)客戶(hù)的樣品數(shù)確定。
 

　　5.對(duì)于細(xì)胞分選的用戶(hù)需提供樣品收集的流式管(Cat：352054)，流式管中裝上4/5體積的培養(yǎng)基。
 

　　6.流式使用完成后，用戶(hù)清理實(shí)驗(yàn)過(guò)程中用完的物品，以保持流式房的衛(wèi)生。
 

　　7.Copy數(shù)據(jù)時(shí)，請(qǐng)自帶光盤(pán)(CD/DVD)，嚴(yán)禁未經(jīng)允許使用優(yōu)盤(pán)拷數(shù)據(jù)。